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白芍和赤芍屬于芍藥科芍藥屬，是同一物種的變種。兩者名字中的顏色不是指花的顏色，而是指根的顏色。
在中藥中，白芍和赤芍是許多不同藥劑配方中使用的重要藥材。赤芍在中醫(yī)中的主要作用是祛血熱、活血化瘀，它最重要的用途和適應(yīng)癥是流行性熱癥的麻疹，嘔血，鼻出血，疼痛的紅腫眼睛，腫脹，膿腫和癤子等。而白芍最好用作補(bǔ)血補(bǔ)品，也可用作“減熱”(或“除熱”)肝藥。根據(jù)中醫(yī)方法學(xué)和理論，白芍有助于治療腹痛和肌肉痙攣。另外，中醫(yī)也相信它對(duì)出汗也有收斂作用，而且在本質(zhì)上是抗菌、抗痙攣和抗炎的。
為了確保兩種芍藥品種的鑒別，我們開(kāi)發(fā)了一種HPLC指紋圖譜方法來(lái)區(qū)別兩個(gè)芍藥品種。
結(jié)果
對(duì)芍藥根樣進(jìn)行了分析，表明赤芍和白芍的植物源提取物是不一樣的。同時(shí)也對(duì)芍藥配方顆粒提取物進(jìn)行了測(cè)定，并與原植物樣品提取物進(jìn)行了比較，以說(shuō)明其與赤芍或白芍之間的關(guān)系。此外，赤芍和白芍兩個(gè)樣品中主要的活性成分——芍藥苷，能很好地被分析標(biāo)準(zhǔn)所識(shí)別。圖1顯示了赤芍和白芍的植物提取物的HPLC圖譜，芍藥苷在13.40min處被檢測(cè)到。赤芍的特征組分的保留時(shí)間為26min，它在白芍樣品中沒(méi)有被檢測(cè)到。圖2顯示了赤芍配方顆粒提取物與赤芍植物提取物的HPLC圖譜。有三種組分（保留時(shí)間為21.34、22.33、22.63 min)在顆粒物提取物中被檢測(cè)到，但是植物提取物中未發(fā)現(xiàn)。
圖1. 赤芍（藍(lán)色）和白芍（紅色）植物提取物的HPLC譜圖
圖2. 赤芍配方顆粒（藍(lán)色）和赤芍植物提取物（紅色）的HPLC譜圖
材料與方法
采用 KNAUER AZURA HPLC plus四元梯度液相色譜系統(tǒng)，結(jié)合具有表面多孔填料的 KNAUER Eurospher II100-5 C18 P silica 色譜柱，建立了芍藥樣品的HPLC分析指紋圖譜方法。
儀器配置
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配置 |
描述 |
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AZURA P 6.1L |
四元梯度泵，0.001~10ml/min,700bar，帶脫氣機(jī) |
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AZURA AS 6.1L |
自動(dòng)進(jìn)樣器，700 bar，100 µl定量環(huán) |
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AZURA DAD 2.1L |
二極管陣列檢測(cè)器，190~700 nm |
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流通池 |
分析型高壓流通池，光程10 mm, 體積10 µl |
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AZURA CT 2.1 |
柱溫箱，5 – 85 °C |
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色譜柱 |
Eurospher II 100-5 C18 P, 250 x 4.6 mm，5µm，帶預(yù)柱 |
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軟件 |
ClarityChrom 或 OpenLab |
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HPLC方法
色譜柱：Eurospher II 100-5 C18 P, 250 x 4.6 mm，5µm，帶預(yù)柱
流動(dòng)相：A：Water + 0.05 % 磷酸；B：乙腈
梯度：0~60min，95% A + 5% B；
流速：1.0ml/min
柱溫：40℃
進(jìn)樣體積：10µL
檢測(cè)波長(zhǎng)：230nm。
結(jié)論
本方法給出了白芍和赤芍提取物的差異，赤芍配方顆粒和根提取物的差異也可以采用該方法進(jìn)行區(qū)別。赤芍和赤芍配方顆粒均檢測(cè)到保留時(shí)間為26min的峰，而白芍未檢測(cè)到此峰，該峰可作為區(qū)別赤芍和白芍的特征峰。
赤芍配方顆粒和赤芍的HPLC指紋譜圖非常相似，只是芍藥苷濃度不同。赤芍配方顆粒含有赤芍沒(méi)有的三個(gè)特征峰，可能和它們?cè)系脑耘嘞嚓P(guān)。
